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          高通量組織研磨儀針對中藥藥材DNA提取的研磨方法

          時間:2020-03-30 瀏覽:67
          實驗目的
           
                 通過提取藥材的DNA,進行DNA條形碼分子對照,進而鑒定中藥。
           
           
           
          實驗原理
           
                 通過對照藥材自身獨有的DNA條形碼記錄,可以準確鑒定出中藥材品種。用DNA條形碼分子法鑒定中藥是藥典中一項重要的鑒定方法。
           
           
           
          實驗材料和器具
           
          樣品:甘草,陳皮,阿膠飲片
           
          儀器:高通量組織研磨儀(上海凈信,Tissuelyser-24)
           
          耗材:不銹鋼研磨罐(上海凈信,10研磨單位),研磨珠(上海凈信)
           
           
           
           
          1.研磨樣品
           
          1.1 分別稱取甘草、陳皮和阿膠飲片各1個研磨單位;
           
          1.2 將樣品分別放入研磨罐中,加入研磨珠;
           
          1.3 將研磨罐放入凈信研磨儀中,設置參數14單位振頻,90s,啟動儀器;
           
          1.4 得到破壁的藥材碎粉
           
           
           
           
          1. 研磨罐和研磨珠需充分清洗干凈并烘干備用;若需提取藥材的RNA,則研磨罐和破碎珠要確保滅酶;
           
          2. 每個10研磨單位的研磨罐大約可研磨1個研磨單位藥材量(具體根據樣品本身的緊密度會有變動,一般樣品體積不超過研磨罐容積的三分之二);
           
          3. 如果放入的樣品沒有脫水或者是水分含量較大的藥草類,需用液氮預冷,具體操作是:把裝好樣品和研磨珠的研磨罐浸入液氮中,直至液氮不沸騰,再迅速將研磨罐放入研磨儀中,設置參數13單位振頻,30s啟動研磨儀,就能得到較好的研磨效果。較堅硬的樣品無需液氮冷凍,如阿膠、鹿茸等。
           
           
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